DEEPSIM

DeepSIM超高分辨显微镜


DeepSIM 是一款基于晶格多点结构光学的超分辨率模块,可以与带有摄像头端口的正置和倒置显微镜兼容, 具有高普及性和高稳定性。既可集成为独立仪器,亦可与 X-Light V3 转盘式装置结合使用,从而确保从宽场到共聚 焦以及从共聚焦到超分辨率的无缝演变。DeepSIM 结构 光由微透镜阵列产生,能够实现最佳光通量、均匀光强和 最佳离焦光反射。与其他基于条纹图案的 SIM 方法相比,DeepSIM 能够确保深度采集的高对比度,大 幅提升图像采集速度和稳健细化,最终确保获得最佳光学切片。


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多种成像模式与全波谱 激发的强强联合

DeepSIM 可以激发 400~750nm 的 全波长光谱,以兼容更多的荧 光基团,提供灵活的无 光谱重叠多通道成像。 DeepSIM 设计用于处理 厚度与共聚焦显微镜相 当的样品,对于非透明化提供超过 50 µm Z 深度的超分辨率数据。这意味着可以使用常规制备方案从样 品中获得更有意义的数据。对于透明化样品可采集超过 130μm 深度的数据。

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DeepSIM:生物应用

超分辨率显微镜可以以前所未有的精细程度来可视化亚细胞组织,但也给生物学家带来了选择最适合其特殊研究问题方法的挑战。 由于采集速度慢,超分辨率商业解决方案目前仅限于一小部分可能的应用, 并且穿透深度不足会影响整个成像结果。 此外,需要光转换荧光团的超分辨率方法需要专门的样本制备。 因此,为满足广泛应用,DeepSIM 系统配备了三个结构光掩模,这些掩模是通过优化微透镜阵列产生特 定的 2D 晶格多点图案。这三个掩模共用相同的微透镜直径,但光点之间的间距不同。三个 DeepSIM 掩 模的横向和轴向分辨率恒定不变。

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A)用 SPY 505-DNA 探针 (Spirochrome)60 倍油物镜染色的 HeLa 分裂细胞的 12 小时延时成像。 图像是使用“高通量” DeepSIM 掩模获得。 

B) 复合体蛋白 3 (SYCP3) 的染色体铺展, 使用 100 倍油物镜和“高通量”掩模。

C) 具有 GFP 表达神经元的透明小鼠脑切片 150 μm 采集厚度),使用 20 倍物镜和“标 准”掩模。

D) 具有 GFP 表达神经元的小鼠脑切片 130 μm 采集厚度)60 倍油镜。图像是使 用“深度成像”掩模获得。



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DeepSIM 依赖于 2D 晶格多点 SIM 技术,XY 分辨率可达 100 nmZ 分辨率可达 300 nm100 1.45 NA 平面复消色差物镜)。 三个专用微透镜掩模以及与低倍镜和高倍镜的兼容性使 DeepSIM 的应 用扩展至各种生物样本,从细胞单层到 3D 细胞培养物以及厚度超过 100 m 的透明组织,其 Z 深度穿透 与共聚焦显微镜相当。 DeepSIM 的光强度具有高光子效率,且时间分辨率超过 10 fps,因此非常适合在 405-750 nm 激发光谱范围内使用多种颜色和传统荧光团进行活细胞成像。

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